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HIV抗体、梅毒筛查技术HIV抗体筛查依据:《全国艾滋病检测技术规范》(2009年修订版)《全国艾滋病检测工作管理办法》艾滋病检测实验室的管理艾滋病检测点的申请和验收程序基本概念HIV形态与结构HIV感染机理(一)HIV感染机理(二)感染HIV后,机体针对HIV基因编码的抗原性物质产生相应抗体,在临床上具有重要诊断学意义的主要是对抗结构基因编码抗原(如gpl60,gpl20,gp41,p66,p55,p51,p31,p24,p17等)的抗体。由于个体差异、各种病毒蛋白的浓度和抗原性强弱不同及不同个体对不同抗原成分的反应性均有所不同,因此相应抗体的产生时间和不同个体对相同抗原成分的免疫应答强度等存在一定差别,此外,检测方法和使用试剂的敏感性不同对HIV抗体的检出时间产生一定影响。在感染HIV后,患者血清中最先出现p24抗原,继之,各种HIV抗原可达到高峰;2-6周后,随着HIV-l抗体产生及浓度的不断增加,HIV抗原渐趋降低或检测不出。临床通用ELISA、免疫印迹法(WB)和目前开始推广的快速诊断法检测HIV抗体。HIV感染的主要检测方法(一)HIV感染窗口期HIV感染的主要检测方法(二)--HIV抗体检测HIV检测程序及流程图样品酶联免疫吸附试验(ELISA)基本原理:是免疫反应物通过化学或免疫学的方法形成酶结合物,酶结合物能与待检样品中相应的抗原或抗体结合成为免疫复合物,然后加入酶底物,经酶的催化或水解作用,无色底物产生颜色,用肉眼、酶标仪观察结果。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。初筛用的HIVELISA试剂目前已经发展到第四代检测试剂。第一代试剂主要以病毒裂解物或部分纯化的病毒抗原包被反应板,以检测血清中的抗体。由于包被的抗原不很纯,假阳性率较高。第二代试剂使用基因工程方法得到的重组抗原和合成肽包被反应板,由于纯化抗原的使用,特异性有了很大提高。第三代试剂使用双抗原夹心法检测抗体,进一步提高了敏感性。--目前国内外主要使用第三代第四代试剂则在第三代的基础上进一步增加了P24抗原的检测,把HIV抗原和抗P24的抗体同时包被反应板,可同时检测血清中的HIV抗体和P24抗原。检出时间提前了4-9.1d,用于血源筛查等。HIV抗体筛查试验基本要求筛查试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、批检合格、临床评估质量优良、在有效期内的试剂。目前常用的筛查试剂有酶联免疫、颗粒凝集和其它快速诊断试剂。建议采用国家参比室试剂考评质量优良的试剂--中国疾病预防控制中心性艾中心网站快速检测(RT)(1)快速检测(RT)(2)样本要求胶体金快速试验-操作步骤胶体金快速试验-结果判断阴性反应失效(无意义)注意事项(一)注意事项(二)检测过程中生物安全要求似疑阳性标本的送检要求(一)似疑阳性标本的送检要求(二)梅毒-实验室检查方法暗视野检查/镀银染色法非梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒血清学实验生物学假阳性的常见原因★职业暴露艾滋病的职业暴露后预防暴露后预防性用药平昌县疾控中心艾滋病筛查室电话:6229956(检验科)13881661866(李勇)谢谢!