苏云金芽孢杆菌按照人们的愿望，在DNA分子水平上进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。别名基因工程操作依据的理论基础棉花细胞(不能抗虫)项目限制酶作用的化学键项目DNA1项目复习项目已知标记基因有抗四环素基因和抗氨苄青霉素的基因，现探讨某细菌的质粒中有无标记基因或标记基因是什么？请设计实验、预期实验结果，并得出相应的实验结论。三大工具非编码区非编码区（一）目的基因主要是______________________。1.基因文库：提取某种生物的全部DNA某种生物的单链mRNA文库类型1.概念：PCR全称为_________________，是一项在生物______复制_______________的核酸合成技术。四种脱氧核苷酸(dNTP)变性（90℃-95℃）：目的基因DNA受热变性后解链为单链；5.过程PCR技术扩增与DNA复制的比较蛋白质的氨基酸序列1.目的：2.基因表达载体的组成：（一）转化：1、将目的基因导入植物细胞的方法：（1）农杆菌转化法①农杆菌特点：③过程：（2）基因枪法（3）花粉管通道法2、将目的基因导入动物细胞①方法：显微注射法②程序：③常用的动物受体细胞：受精卵和卵细胞3、将目的基因导入微生物细胞①原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少②方法：（二）方法四、目的基因的检测与鉴定2、检测目的基因是否转录出了mRNA（二）鉴定（个体生物学水平）人体细胞获取目的基因从基因文库中获取目的基因利用PCR技术扩增目的基因化学方法人工合成目的基因构建基因表达载体目的基因、启动子、终止子、标记基因将目的基因导入受体细胞植物、动物、微生物目的基因的检测与鉴定检测：分子水平是否插入、转录、翻译鉴定：个体水平基因工程的基本工具？限制酶的特点？DNA连接酶和载体的种类？基因工程的基本操作程序？获取目的基因的方法？基因工程的核心步骤是？基因表达载体的组成？将抗虫基因转移到棉花细胞中遗传和表达称为？将目的基因导入植物、动物、微生物细胞的方法？T-DNA的特点？目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键？目的基因的检测与鉴定的方法？一、植物基因工程硕果累累(一)抗虫转基因植物(二)抗病转基因植物(三)抗逆转基因植物(四)利用转基因改良植物的品质二、动物基因工程前景广阔3.用转基因的动物生产药物获取目的基因（例如血清蛋白基因）4.用转基因的动物作器官移植的供体三.基因工程药品异军突起作用：胰岛素是治疗糖尿病的特效药。传统生产方法：主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取，每100kg胰腺只能提取4~5g胰岛素。产量低，价格昂贵。基因工程方法：1979年，科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组，并在大肠杆菌内实现了表达。1982年，美国一家基因公司用基因工程方法生产的胰岛素投入市场，售价降低了30%~50%。基因工程药品——干扰素基因工程药品——生长激素四、基因治疗曙光初照3）基因治疗的方法4）用于基因治疗的基因种类多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如图。据图回答下列问题：(原生质体是去掉细胞壁的植物细胞)(1)若已获取PG的mRNA，可通过________获取PG基因。重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是__________________________________________________________________。(2)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有________的培养基进行筛选，理由是________________________。之后，还需将其置于质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞________现象来鉴别细胞壁是否再生。(3)由于导入的目的基因能转录出反义RNA，且能与________互补结合，因此可抑制PG基因表达的翻译过程。若______________，则可确定转基因番茄培育成功。知识回顾1例如：1与基因工程的关系：蛋白质工程流程图：蛋白质工程的主要步骤通常包括：某多肽链的一段氨基酸序列是：……丙氨酸-色氨酸-赖氨酸-甲硫氨酸-苯丙氨酸……丙氨酸：GCU、GCC、GCA、GCG色氨酸：UGG赖氨酸：AAA、AAG甲硫氨酸：AUG苯丙氨酸：UUU、UUC蛋白质工程目前的现状：成功的例子不多，主要是因为蛋白质发挥其功能需要依赖于正确的空间结构，而科学家目前对大多数蛋白质的空间结构了解很少