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实验三巴斯德效应二、基本原理3,5-二硝基水杨酸比色定糖法原理:3,5-二硝基水杨酸与还原糖溶液共热后被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的量和棕红色物质颜色深浅的程度成一定比例关系,可用于比色测定,通过与还原糖的标准曲线比较,可得出溶液中的还原糖量。此法操作简便、快速、杂质干扰少。三、实验器材四、操作步骤接种培养:分好养与厌氧两种好氧培养:取菌悬液各1ml,分别接种于两个装有50ml培养液的500ml三角瓶中。28oC摇床培养,培养时间24_48小时,摇床转速200转/分。设接无菌水对照。厌氧培养:化学吸氧法+干燥器培养。各取1ml的两种悬液,分别接种装有30ml培养液的大试管。预先在干燥器内装焦性没食子酸和NaOH,将接种的试管放入干燥器内,在器皿上涂上凡士林,使之密封,然后抽气10至15分钟关闭活塞。晃动干燥器,使NaOH倾倒与焦性没食子酸混合,产生吸氧作用。每克焦性没食子酸在过量碱液中能吸收100ml空气中的氧,常用1克焦性没食子酸加10%的NaOH10ml配制。取样测定:菌体干重:分别取发酵液10ml于已称好干重的离心管中,5000-6000转/分,离心5分钟,取上清液于另一离心管中,带菌体的离心管放入105_110oC烘箱中,烘干1小时,冷却后称重,然后求出每ml菌液中菌体干重。发酵液中还原糖含量:同时取培养液的上清液(去除菌体)及对照培养基,按下表加入试剂:管号操作五、结果与讨论