预防医学实验指导食物钙的测定（EDTA滴定法）一、原理：在PH12—14时，钙与EDTA（H2Y2-）能定量地形成金属络合物，并且其稳定性较钙与钙红指示剂（HIn2-）形成的络合物为强。用EDTA溶液滴定含有钙红指示剂的待测液，则EDTA先与溶液中的游离钙络合，近等当点时，EDTA夺取指示剂钙络合物中的钙，形成稳定的EDTA—Ca络合物并游离出指示剂，颜色由紫红色变为天蓝色即为终点。根据EDTA的用量可确定溶液中钙之含量。络合滴定反应如下：H2Y2-+Ca2+=====CaY2-+2H+Ca2++HIn2-=====CaIn-+H+CaIn-+H2Y2-=====CaY2-+HIn2-+H+（紫红色）（天蓝色）二、操作：1、EDTA溶液的标定：取钙标准液10ml放入,50ml的三角烧瓶中,加蒸馏水10ml,用0.5NNaOH（约1滴）调PH至中性（7.0）,0.05M柠檬酸钠2滴，2NNaOH2ml,钙红指示剂5滴,加指示剂后迅速以0.01M的EDTA溶液滴定至天蓝色为终点,记录所消耗的EDTA量。按下式计算EDTA溶液对钙的滴定度（T）：T=式中：V—消耗的EDTA溶液毫升数T—1毫升EDTA溶液相当钙的毫克数2、样本滴定：取样本液10ml,放入50ml的三角烧瓶中,加蒸溜水10ml,用0.5NNaOH调PH至中性,以下操作与EDTA溶液标定相同,记录所消耗EDTA量。3、空白对照滴定：取蒸馏水20ml,放入50ml的三角烧瓶中,用0.5NNaOH调PH至中性,以下操作与EDTA溶液标定相同,记录所消耗的EDTA量。三、计算：样本含Ca量(mg/100g)=式中：A—样本消耗EDTA溶液的毫升数B—空白消耗EDTA溶液的毫升数T—滴定度(mgCa2+/ml)W—称样克数10V0—样本定容毫升数100V1—从V0中取出用于滴定的毫升数10四、注意事项：①加钙红指示剂后应立即滴定，放置过久造成终点不明显。②柠檬酸钠除去Fe的干扰。