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DNA的粗提取与鉴定课件新人教版选修讨论2:如何证明他们是遗传物质?1、提取生物大分子的基本思路选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子(1)DNA的溶解性DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反(2)DNA在酒精溶液中的溶解性DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步分离1、在沸水浴中,DNA遇二苯胺会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂(一)实验材料的选取(一)实验材料的选取动物细胞的破碎较易,例如,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可2、植物细胞①植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜讨论:如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质讨论:方案二与方案三的原理有什么不同?具体做法:方案一:30mL滤液+35gNaCl→同方向搅拌,DNA溶解→加入蒸馏水→DNA析出→过滤得到过滤物→放到2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA-NaCl溶解液方案二:30mL滤液+嫩肉粉(木瓜蛋白酶)→静置10~15分钟→DNA滤液方案三:30mL滤液→60~75℃处理→过滤获得DNA滤液(四)DNA的析出与鉴定鉴定DNA时在试管中先加入物质的量的浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml于两只试管中,其中一只加入DNA丝状物,各加入二苯胺4ml试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两只试管中溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否有蓝色1、以血液为实验材料时,每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠,防止血液凝固。2、加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作。加入酒精和玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。3、二苯胺试剂要现配现用,否则会影响鉴定的效果。制备鸡血细胞液…………加柠檬酸钠,静置或离心↓破碎细胞,释放DNA…加蒸馏水,同一方向搅拌↓→过滤,除去细胞壁、细胞膜等。溶解核内DNA………加入NaCl至2mol/L,同一方向缓慢搅拌↓DNA析出……加蒸馏水至0.14mol/L,过滤,在溶解到2mol/L溶液中↓→除去细胞质中的大部分物质。DNA初步纯化………与等体积95%冷却酒精混合,析出白色丝状物↓→除去核蛋白、RNA、多糖等。DNA鉴定………………二苯胺,沸水浴,呈现蓝色2.实验中NaCl的物质的量浓度为2mol/L和0.14mol/L对DNA有何影响?3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成()A.砖红色B.橘黄色C.紫色D.蓝色