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实验室检查一、血液采集静脉采血;颈静脉、前臂头静脉、后肢隐外静脉、隐内静脉心脏采血;胸右侧第四或第五肋间抗凝剂:乙二胺四乙酸(EDTA):对血红蛋白、血小板计数、血片染色均无影响,通常配成10%溶液,每2滴可使5毫升血液不凝固,但不能用于输血。草酸钾:优点溶解度大,抗凝作用强,缺点能使红细胞缩小,不适合用于红细胞压积的测定。草酸铵与草酸钾合剂:草酸钾4克,草酸铵6克,蒸馏水1000毫升,不能用于输血。枸橼酸钠:常用于血沉测定和输血时的抗凝剂,不适用于血液化学检查,配成3.8%溶液,与采血量以1:10比例加入肝素:不宜做纤维蛋白原测定,其抗凝血涂片染色时,白细胞的着染性较差。血样保存最长期限:白细胞计数2~3小时,红细胞计数、血红蛋白测定21小时,红细胞沉降率3小时,红细胞压积测定24小时,血小板计数1小时放入冰箱内保存红细胞计数红细胞计数:是指计算每立方毫米血液中所含红细胞的数目。兽医临床多采用在试管内稀释的血液进行显微镜计数。目前应用广泛的是血球自动计数仪计数。实验所需的试剂:生理盐水、蒸馏水、酒精、乙醚及动物血液等实验器材:显微镜、计数板、计数器、血盖片、小试管、5mL吸管、吸(洗)尔球、脱脂棉、擦镜纸等实验的主要方法及步骤(稀释法)1.血液的稀释:用生理盐水作为稀释液,血液作200倍或是400倍稀释2.寻找计数室:将计数板盖上血盖片平放在显微镜的载物台上,在低倍镜、暗视野下寻找计数室3.充液:将配好的稀释液用吸管吸取一滴充在计数板与血盖片之间,并静置1~2min,等待红细胞全部下沉方可计数4.计数:在高倍镜下计数,计红细胞计数室中的四角的及中央的一个总共是5个中方格的红细胞数。分别按照一定的顺序及压线的原则。五个中方格分别用:x1、x2、x3、x4、x5表示。总数用X表示5.计算:每立方毫米血液中所含的红细胞总数用“R”表示R=(x1+x2+x3+x4+x5)×5×10×血液稀释倍数,其中:x1~x5为五个中方格的红细胞数,5表时只数5个中方格的数目,故算出1mm2的红细胞数,则要乘以5,10表示:计数室的深度为0.1mm,要算出1mm的红细胞数,则要乘以10。注:各种动物正常数值见书(注意单位)注意事项1.所用的器材必须是清洁干燥的2.吸取液体的量一定要准确,过多或过少都会影其结果3.使用显微镜一定要规范,将其平放4.充液时要将稀释液摇匀,量不可过多也不能太少,不能有气泡5.寻找计数室时光圈要尽量关小,不要关死,否则在高倍镜下就看不到计数室6.在计数时,不要把杂质和红细胞相混淆,否则就会影响结果7.五个中方格一定要找准确,特别是中间的中方格的确定临床意义红细胞增多:红细胞和血红蛋白含量增多,绝大多数为相对增多,见于各种因素导致的脱水等红细胞减少:红细胞和血红蛋白含量降低,主要是由于红细胞损失过多或生成不足所致,可见于各种贫血和失血、溶血、红细胞生成障碍等二、白细胞计数实验试剂1%~3%冰醋酸或1%盐酸、蒸馏水、酒精、乙醚及动物血液等实验器材显微镜、计数板、计数器、血盖片、小试管、0.5mL吸管、吸尔球、擦镜纸等实验步骤红细胞计数白细胞计数血液稀释取4mL的生理盐水于小试管中,然后用血红蛋白吸管吸血液10µL,将管外壁的血液擦拭干净,放置于装有生理盐水的小试管中,混匀白细胞稀释液0.38mL或0.4mL;用沙利氏吸管吸取供检血液20μL,加入试管内,混匀寻找计数室将计数板盖上血盖片平放在显微镜的载物台上,在低倍镜下,暗视野下寻找计数室与红细胞计数相似,只是将镜头调到白细胞计数室中(四角的4个大方格中的任何一个)充液将配好的稀释液用吸管吸取一滴充在计数板与血盖片之间,并静置1~2min再计数同红细胞计数计数在高倍镜下计数,计红细胞计数室中四角及中央各一个中方格,总共4个中方格中的红细胞数用低倍镜计数,计4个角上的4个大方格(共有16×4=64个中方格)的白细胞数,按顺序全部数完计算每立方毫米血液中所含的红细胞总数(个/mm3)=(x1+x2+x3+x4+x5)×5×10×稀释倍数白细胞数(个/mm3)=W/4×10×20=W×50或白细胞数(个/L)=W/4×10×20×106注意事项与红细胞计数相似,但也有区别:在计数时,不要把杂质和白细胞相混淆,否则就会影响结果四个大方格的白细胞数之间的误差不能超过20%临床意义1.白细胞增多:可见于多数细菌性感染和炎症,白血病时以白细胞的显著增多为特征2.白细胞减少:主要见于某些病毒性传染病,长期应用某些药物等白细胞分类计数三、白细胞分类计数实验试剂瑞氏染色液、缓冲液、蒸馏水、香柏油等实验器材载玻片、脱脂棉、玻璃铅笔、吸水纸、染色缸及染色架、试管架、显微镜